1、实验室检查
（1）硫胺素负荷试验：口服5mg或肌注1mg维生素B1，留4小时尿，测排出硫胺素的量，正常在100μg以上，脚气病患者则低于50μg，甚至为零。
（2）测血液中丙酮酸和乳酸含量，脚气病患者皆明显升高，有助确诊，且大多数病例二氧化碳结合力降低明显。
（3）测定红细胞的酮基移换酶活性，脚气病患者该酶活性显著减低。
上述试验中以后二种结果更为可信，因可从硫胺素缺乏导致的代谢紊乱状况估计实际硫胺素缺乏的程度，而负荷试验仅反映硫胺素摄取后的即刻水平，而不反映硫胺素在组织中的存储及分布，更不能表达硫胺素缺乏所致的生化改变。
2、X线检查
显示心脏向两侧扩大，尤以向右扩大为主。
3、心电图
显示P波与QRS波振幅增高，T波低于或倒置，QT新时期延长，婴儿患者可呈低血压，偶见窦性心律不齐，脉搏图为二重脉。
维生素B1缺乏病的诊断：
临床应排除下列疾病如病毒性脑炎，脑膜炎，急性喉炎，手足搐搦症，急性中毒，破伤风，先天性心脏病等。
维生素B1缺乏病的治疗：
药物治疗：发病的第一周，应每日给维生素B1至少10mg。第二周起直到临床症状消失，每日给药3～5mg。以后的维持量为每日1～5mg。当婴儿脚气病时，其乳母无论有无硫胺素缺乏症状，也应同时给予治疗，日服维生素B150mg，待患儿痊愈后改为维持量。由于患者常伴同其他B族维生素缺乏症，故同时应给口服复合维生素B或酵母片。
遇到冲心型脚气疾患者，必须尽速抢救。常用吸收快且作用较持久的优硫胺（丙硫硫胺）或呋喃硫胺（不被人体中所含的硫胺酶所破坏，毒性反应亦低），首剂 50～100mg静脉注射。以后宜隔3～4小时重复用药，直至心力衰竭控制后，剂量减少或改为每日2～3次维持治疗一周。对呼吸困难、酸中毒等表现，应同时吸入氧气，静脉滴洋适量5%碳酸氢钠等对症疗法。静脉推注高渗葡萄糖对心型脚气禁用，因可导致心跳突然停止。亦不宜注射可拉明、山梗菜碱等呼吸兴奋剂，以防使机体耗氧量增加，反使抽搐加剧。使用洋地黄控制脚气病心衰也是有害的。