体检
注意生长发育情况，有否矮小、畸形。注意神志、体温、脉搏、血压、皮肤颜色与干湿度，巩膜有无黄染，心界大小如何，肝脏是否肿大、压痛，肌张力和膝反射有无异常，有无其他休克或心衰体征。
检验与辅助检查
血糖测定：婴幼儿童空腹血糖≤2.22mmol/L，足月婴儿生后3日内≤1.67mmol/L，早产儿或小样儿≤1.11mmol/L(血清或血浆葡萄糖值比全血高15～20%)，即可诊断为低血糖。
根据临床考虑的可能病因，有条件可选作下列试验：
血和尿液酮体检查；
尿糖测定：尿糖阳性时用层析法鉴定有否半乳糖和果糖；
葡萄糖耐量试验：口服法(葡萄糖1.25～2.5g/kg)曲线平坦提示吸收不良或血胰岛素过高，3h后血糖仍继续降低说明肾上腺皮质或垂体对低血糖缺乏反应；静脉法(葡萄糖0.5～1g/kg，25%葡萄糖液不超过100ml)，静注后血糖继续上升者有肝糖原累积症可能；
胰高血糖素(0.01～0.03mg/kg，不超过1mg)试验：肌注于10～20min内血糖上升高于空腹水平40%～60%为正常，低于此值提示糖原分解障碍；
肾上腺素(0.01～0.03mg/kg，不超过0.3mg)试验：是一种糖原动员能力试验，注射后血糖上升不到空腹水平的30%～70%为异常；
亮氨酸耐量试验：口服亮氨酸150mg/kg后，血糖于20～45min内下降超过空腹水平的40%，提示亮氨酸过敏；
血液胰岛素测定：超过10mU/L(正常<5mU/L)表示胰岛素分泌过多；
怀疑生长激素缺乏和肾上腺皮质功能低下时可测定血浆生长激素及可的松；
肝功能检查及血氨测定；
肝脏活检及糖代谢有关酶活性检查。
必要时作脑电图和肝超声检查和肝胰CT、MRI检查。